Білок Бенс-Джонса
Урина здорової людини не містить білок Бенс-Джонса, який представлений легкими ланцюгами імуноглобулінів, які виявляються в результаті формування злоякісних пухлинних процесів.
Лабораторні дослідження на наявність специфічного низькомолекулярного білка необхідні в діагностуванні ряду патологічних станів (частіше проблем β-системи імунітету), а також з метою визначення ефективності застосовуваної терапії.
В надлишку білок Бенс-Джонса продукується плазматичними клітинами, переміщається з потоком крові, а виводиться шляхом сечовипускання. Саме остання властивість білкових тіл дозволяє при дослідженні сечі запідозрити наступні хвороби:
Миелому;
Остеосаркому;
Плазмоцити;
Лімфолейкоз в хронічній стадії;
Лімфогранулематоз;
Амілоїдоз первинного типу;
Макроглобулінемію;
Ідіапатіческую моноклонового гаммапатія.
Клінічно підтверджено зв'язок між виділенням специфічного білка і подальшими порушеннями роботи нирок, зумовленими токсичним впливом білкових тіл на епітеліальні структури канальців нирки, що в свою чергу викликає явище дистрофії, синдром Фанконі, нирковий амілоїдоз.
До кого звернутись?
лаборант
онколог
гематолог
Білок Бенс-Джонса в сечі
Присутність білка в урине називається протеїнурією. Під преренальної протеїнурією розуміють зміст в сечі великої кількості низькомолекулярного білка. При цьому пошкодження ниркового фільтра і канальців відсутня, а нормальне функціонування нирок не здатне забезпечити реабсорбцію білкових тіл. Позанирковим (помилкова) протеїнурія, тобто протікає без порушення функцій нирок, вказує на наявність інфекційного або злоякісного процесу в організмі. Протеїнурія відзначається в 60-90% випадків хворих мієломою. Близько 20% патологічних станів припадають на миелому Бенс-Джонса.
Білок Бенс-Джонса в сечі диференціюється внаслідок гуморальних зрушень β-системи імунітету. Поява білкових тіл пов'язують з миеломной патологією, парапротеїнемічні гемобластозами, ендотеліоз, макроглобулінемія Вальденстрема, лімфатичної лейкемію, остеосаркомі. Виявлення в урине білка Бенс-Джонса - важлива діагностична і прогностична етап. Білок Бенс-Джонса на увазі низької молекулярної маси виділяється з сечею, пошкоджуючи епітелій канальців нирок, можуть бути причиною виникнення ниркової недостатності, здатної привести до летального результату. Важлива також своєчасна класифікація білка відповідно до типу: λ-білок володіє великим нефротоксичну дією ніж κ.
Аналіз на білок Бенс-Джонса
Присутність білкових тіл, відмінних від сироваткових, в урине вказує на лімфатичну лейкемію, остеосаркоми або мієломи (пухлинні процеси кісткового мозку). Білок Бенс-Джонса при нагріванні фільтрату сечі до 45-60º С випадає у вигляді мутного осаду, що осідає на стінках пробірки. Подальше збільшення температури до величин кипіння розчиняє виділену муть.
Кількісний аналіз на білок Бенс-Джонса проводиться наступним чином:
Використання частини води і частини азотної кислоти в якості реактиву;
Приміщення в пробірку кислоти азотної (0.5-1мл) з нашаруванням такого ж рівня досліджуваної сечі;
Оцінка результату через 2 хвилини (прояв тонкого кільця на кордоні рідких середовищ свідчить про присутність 0.033% білкових тіл).
Спостереження нитевидного кільця вимагає розведення урини з водою у співвідношенні 1: 1, поява товстого кільця говорить про необхідність змішування частини сечі з трьома частинами води, а в разі компактного кільця порцію урини розбавляють сім'ю порціями води. Причому розведення продовжують до тих пір, поки характерний осад не проявить себе на 2-3-ій хвилині тестування.
Кількість що міститься білка обчислюється множенням 0.033% на величину розведення. Наприклад, урину розбавили в 10 разів, кільце білкових тіл проявилося в кінці 3-го хвилини вивчення, то процентне включення білка вираховують так: 0.033х10 = 0.33.
При відсутності випадання осаду, оцінюють ступінь помутніння - виражені, слабкі або ледве помітні сліди каламуті.
Секреція білка Бенс-Джонса
По виду секретується імуноглобуліну розрізняють:
Патології легких ланцюгів (секреція білка Бенс-Джонса);
Гломерулопатії (секреції інших імуноглобулінів).
Можливі також різні комбінації ураження нирок. Як показує практика, нефропатія є наслідком лімфопроліферативного патології (множинна мієлома, лімфолейкоз хронічного перебігу, хвороба Вальденстрема і т.п.). Виділяючись в кровотік, подібно до всіх білків з масою молекул до 40 кДа легкі ланцюги минуть нирковий фільтр, потім за допомогою лізосом розпадаються на олігопептиди і амінокислоти. Надлишок легких ланцюгів провокує дисфункцію реакції катаболізму і можливого виділення ферментів лізосом, що тягне за собою некроз тканин канальців. Білкові тіла призводять до нездатності реабсорбції, а при з'єднанні моноклональних легких ланцюгів з білком Тамма-Хорсфалла в дистальних канальцях формуються білкові циліндри.
Білок Бенс-Джонса при мієломної хвороби
Під множинною мієломою розуміють патологічний стан, коли організмом замість повноцінних продукуються легкі іммуноглобуліновие ланцюга. Діагностика та контроль стану проводяться шляхом лабораторного дослідження урини, яка б показала кількісний вміст білкових тіл. Конкретизація підтипу мієломи базується на аналізі сироватки крові. Клінічні ознаки захворювання включають: больовий синдром кісток, дисфункції сечовипускання, гематоми незрозумілого походження, затримку рідини в організмі.
Білок Бенс-Джонса при мієломної хвороби виявляється на підставі стандартного тестування, що показує кількісний вміст білкових тіл і оцінює ступінь ураження нирок. Ідентифікація білка в сечі пояснює пошкодження епітелію зі склерозированием ниркової строми, з часом формують ниркову недостатність - поширену причину смертності в результаті мієломний поразки (білок Бенс-Джонса повністю забиває канальці, перешкоджаючи сечовиділення).
Статистичні дані вказують на те, що мієлома диференціюється у чоловіків старше 60 років, що мають в анамнезі генетичну схильність, які страждають ожирінням і иммуносупрессией, а також перенесли вплив токсичних і радіоактивних речовин.
Визначення білка Бенс-Джонса
Для диференціювання специфічного білка проводиться лабораторне вивчення середньої порції ранкової урини (потрібно обсяг не менше 50мл). Присутність білка Бенс-Джонса з визначенням кількісної складової можливо шляхом іммунофіксаціонного методу. Поділ білків відбувається за допомогою електрофорезу з подальшою іммунофіксаціей за допомогою спеціальних сироваток. При зв'язуванні білка з антитілами легких і важких ланцюгів імуноглобулінів формують імунні комплекси, що оцінюються при фарбуванні.
Слід зазначити, що навіть мінімальна концентрація білка видно хоча б з преціпітаціонной реакції на кислоту сульфосаліцилову. Визначення білка Бенс-Джонса проводять з'єднанням відфільтрованої урини (4мл) з ацетатним буфером (1 мл). Подальший нагрів до 60º С на водяній бані і витримка протягом 15 хвилин при позитивній пробі дає характерний осад. Дана методика вважається максимально достовірної. Негативно вплинути на результати аналізу може надмірно кисла або лужне середовище і низька відносна щільність сечі.
Методи дослідження, при яких білок Бенс-Джонса розчиняється в результаті нагрівання до 100º С або вдруге осідають при охолодженні, є ненадійними, так як не всі білкові елементи мають відповідні характеристики. А ось використання індикаторного паперу зовсім не придатне для виявлення білка Бенс-Джонса.
Комментарии
Отправить комментарий